胶体金做定量其实它的本质上其实不太合适。有很大的缺陷。
姑且不论样品垫金标垫材质以及NC膜的影响。
1、就以胶体金而言，制作出来的不同批次胶体金颜色本身就会有一定差异。胶体金截留在T线位置时，实际上不止我们表面看见的。NC膜实际是有厚度的，我们在用机器把蛋白划到NC膜上时，溶液在NC膜上扩散不止是横向扩散还会纵向扩散，当层析的时候有大部分胶体金也会被截留在NC膜的表面以下。而我们机器读数往往只是读的表面灰度。
2、再说说机器的问题。我们现在市面上的胶体金读数仪原理都是扫描或照相，通过灰度读峰值或面积。其实机器本来就会有差异，如果放卡壳的地方漏光，那么读书偏差会更大。这种差点的机器读数同一个试纸可能都能达到5-10%的误差。
3、同时我们的样品个体之间颜色就会存在较大差异，在NC膜的表现上就是背景颜色有较大的差异，为读数准确带来更大的难题。还有胶体金也可能有部分在NC膜上的残留这样也会导致误差的产生。
再比如金垫、样品垫的位置差异，NC膜贴的位置差异、CT线位置差异、金量差异、时间差异。要想把总CV控制在15%以内都是做的比较理想状态的了，实际上很难达到。
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